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发布时间:2022-09-07 15:08:34
TwistDx相关问题
1. RPA能实现多重化吗?
可以。RPA技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。不过,多重化的引物组合需要精心设计,以便每个引物都能同样有效的工作。需要注意的是,RPA反应的引物总量(nmol)尽量不要超标太多。如果在-一个反应中使用两个以上的扩增引物,就应该控制不同引物的量。另外,我们应当事先考虑好检测多个扩增事件的探针、设备以及荧光团的兼容性。
2.能否对模板进行定量?
可以。扩增子达到可检出水平的时间,依赖于反应起始时的模板量。初始模板的拷贝越多,扩增子就越快达到可检出水平。不过,这种定量需要精心的实验安排,确保对照反应是同时开始的。举例来说,可以利用镁离子的添加时间进行控制。因为镁离子一一旦进入体系,RPA反应就会开始。此外,较慢的扩增过程有助于更精准的定量。我们可以通过调整反应条件或引物设计来减慢RPA的反应速度。
3能否进行荧光终点分析?
可以。这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光,荧光增强意味着发生了扩增。
4能否支持生物素或荧光标记的寡核苷酸?
支持。在RPA反应中,连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。据悉还没有发现任何差异。
5跑胶前需要回收RPA产物吗?
需要。RPA反应中的物质会干扰琼脂糖电泳,如果不进行产物回收,跑出来的带会出现拖尾。
TwistDx恒温扩增应用
TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。
RPA反应的适宜温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的cDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。
试剂盒包括两类:①.TwistAmp冻干研发试剂盒(包括TwistAmp Basic试剂盒、TwistAmp exo 试剂盒和TwistAmp nfo 试剂盒共三种);②. TwistAmp液态研发试剂盒(包括TwistAmp Liquid Basic 试剂盒和TwistAmp Liquid exo 试剂盒共两种)
立博泰业拥有先进的技术,我们都以质量为本,信誉高,我们竭诚欢迎广大的顾客来公司洽谈业务。如果您对TwistDx试剂盒感兴趣,欢迎点击左右两侧的在线客服,或拨打咨询电话。
TwistDx
TwistDx Inc. 由分子生物学家兼蛋白生物化学家 Niall Armes 博士以及 Derek Stemple 博士和 Nagesh Mahanthappa 博士于 1999 年共同创立,其总部位于英国马萨诸塞州剑桥市。TwistDx Limited 于 2002 年成立,其运营设施位于英国剑桥。
我们的愿景:TwistDx 希望将 RPA 分子检验和技术普及到所有可应用领域,使科学家和技术开发人员不再受到高温 DNA 扩增技术的束缚。
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