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公司地址: | 北京市海淀区天秀路10号中国农大国际创业园3号楼5层5046 |
发布时间:2022-09-05 09:07:11
恒温快速扩增***盒应在怎样的温度下使用?
标准的ERA扩增***盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响,因为酶会逐渐地失去全部活性。对于RT***盒,我们建议客户在40℃下运行反应,因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。
立博泰业——多年销售恒温快速扩增***盒,我们公司坚持用户为上帝,想用户之所想,急用户之所急,以诚为本,讲求信誉,以产品求发展,以质量求生存,我们热诚地欢迎各位同仁合作共创辉煌。
恒温快速扩增***盒常用酶原料
尿DNA糖基化酶尿DNA糖基化酶(UDG酶)又称尿-N-糖基化酶(UNG酶),可水解含尿的单链和双链DNA释放出游离尿,而对RNA无活性,与dUTP搭配使用,可建立成PCR防污染体系。其原理如下:在PCR体系中将dTTP部分或全部替换为dUTP后,使得反应生成含有dU碱基的扩增产物,这些扩增产物不同于天然模板,在进入含有UDG酶的反应体系时,可被UDG酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的N-糖基键,而经切割后的DNA链在碱性或高温条件下易于断裂降解,从而失去被当作模板再扩增的能力,因此可防止扩增子污染(如下图)。市面上的UDG酶主要有普通型和热敏型,其中热敏型UDG酶在室温条件下即可催化反应,50℃以上加热可使其灭活,防止其降解后续PCR形成的含dU扩增产物。虽然UDG/dUTP体系具有防污染功能,但在实际测试中还得兼顾PCR的效率和灵敏度。一方面需确保PCR扩增产物掺入足够量的尿碱基,从而可被UDG有效切割;另一方面也需要保证反应体系添加的dUTP不会明显影响PCR效率,因此dTTP和dUTP的佳比例需通过优化确定。
恒温快速扩增***盒应在什么样的温度下应用?
规范的ERA扩增***盒通过配置可在37℃-42℃的温度范畴内实际操作。过高的温度会对反映管理体系造成不好的危害,由于酶会慢慢地丧失所有活性。针对RT***盒,大家提议用户在40℃下运作反映,由于逆转录酶在稍高温度下具备更高的活性。 立博泰业——很多年市场销售恒温快速扩增***盒,企业坚持不懈用户为造物主,想用户之所感,急用户之所急,以诚为本,注重信誉度,以商品求发展趋势,以品质谋发展,大家诚挚地热烈欢迎各位同仁协作共赢未来。
恒温扩增***盒设计及储存
荧光探针设计:
在上下游引物中间,设计- -段长度为46-52nt与目的片段互补的序列作为荧光探针;
探针序列不与特异性引物识别位点重叠,长度为46-52 nt ,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。
***盒储存:
运输条件:低温运输;
储存条件:储存温度≤-20°C ,避光保存,避免重压、反复冻融:
产品有效期: 12个月。
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