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RPA是什么？

自PCR技术诞生以来已经有三十年了。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字PCR，这一技术在不断蜕变却从未淡出我们的视野。

英国TwistDx Inc公司开发的重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp? 核酸扩增产品，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低，特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物防御和农业等领域。

TwistDx***盒

我国主要的几种检测***盒都是基于RT-PCR原理。因为需要检测的病毒样本浓度有高有低，高的容易检测，低浓度就会漏掉。所以PCR的方法就把病毒***扩增很多倍，达到可以检测出来的浓度。基本操作如下：

01  收集咽拭子等病毒样本，通过***打碎保护病毒的蛋白质壳子，萃取病毒RNA。一方面是萃取，另一反面，打碎之后就没有了性，相对安全一些。

02  由于这次新冠是单链RNA病毒，所以要先转换成cDNA。这个可以类比像是视频文件,mp4,rmvb,***i这些都是常见格式，同一个视频不同格式，意思都一样，可以互相转换。

03  常规PCR反应，加热到94℃把DNA拉链拉开，之后再55℃-60℃让引物，就是拉链扣分别套在两条拉链上，再升温到72℃让拉链自己，用左拉链做模板造一个右拉链，用右拉链做模板造一个左拉链。这样折腾一次为一个循环，RNA数量翻一倍。之后再折腾25-30次。这样就算很少量的病毒这个时候也显现出来了。

目前常见的检测有核酸检测和检测。前者通过扩增患者样本中的病毒核酸，直接判定病毒的存在与否。而后者则是通过的存在，来间接推断出是否病毒。所以从检测的性质来看，就已不难理解其准确性会大大低于核酸检测。特别对于还没来得及形成的早期者以及刚刚***的患者而言，检测的结果一般都不太可靠。因此，检测并不能用于诊断新冠，主要用于协助临床诊断。