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发布时间:2022-06-05 04:46:33
科普|恒温扩增***盒常用酶原料
NEAR相关酶
切口酶扩增反应(Nicking Enzyme Amplification Reaction, NEAR)是一种基于切刻内切酶切割特性的恒温扩增方法,详细原理可参考啥黑科技可10分钟完成核酸分子检测?。其使用的酶有两种:切刻内切酶:如Nt.BstNBI切刻内切酶,该类酶不同于常规限制性内切酶,其识别特定序列后仅在DNA其中一条链上切割形成缺口,并暴露出游离的3’端;DNA聚合酶:如Vent (exo-) DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶,用于DNA链合成,同时具有链置换功能。
恒温快速扩增***盒应在什么样的温度下应用?
规范的ERA扩增***盒通过配置可在37℃-42℃的温度范畴内实际操作。过高的温度会对反映管理体系造成不好的危害,由于酶会慢慢地丧失所有活性。针对RT***盒,大家提议用户在40℃下运作反映,由于逆转录酶在稍高温度下具备更高的活性。 立博泰业——很多年市场销售恒温快速扩增***盒,企业坚持不懈用户为造物主,想用户之所感,急用户之所急,以诚为本,注重信誉度,以商品求发展趋势,以品质谋发展,大家诚挚地热烈欢迎各位同仁协作共赢未来。
恒温扩增***盒操作步骤
提前30分钟将***盒所需组分取出,室温融化。鹿荡混匀。
1).每个干粉反应管加入29.4 uL Abuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 uLAbuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响) ;
2.每个反应管分别加入2 uL上游引物、2 uL下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μM ,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中)
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